کارگاه عملی PCR و آشکارسازی محصولات PCR توسط الکتروفورز (22 اردیبهشت 1401)

 

گزیده ای از سخنان مدرس:

در گذشته براي توليد قطعات نوكلئوتيدي معمولا از روش هاي شيميايي استفاده مي‌كردند و یا برای بدست آوردن نسخه های متعدد از يک ژن خاص، اين ژن را به داخل حامل مناسب وارد کرده و در يک باکتری تکثير می نمودند. اين روش ها پر زحمت بوده و نياز به مدت زمان طولاني داشتند. در واکنش زنجیره ای پلیمراز(PCR)، DNA در شرایط آزمایشگاهی کپی برداری می شود  این روش اولین باردر سال 1984 توسط کری کولیس (Kary Mulis) کارمند شرکت Cetus ارائه شده است.  PCRمزاياي بسیاری داشت از جمله بررسي يك روزه نمونه ها، ارزان بودن نسبي، آساني انجام و فوق العاده اختصاصي بودن  و انقلابي در تشخيص كلينيكي بيماري ها، پزشكي، علوم جنايي و پليسي، ميكروبيولوژي و بسياري صنايع ايجاد كرد. اين تکنيک تمامی مشکلات قبلی در زيست مولکولی که  ناشی از عدم دسترسی به مقادير زياد از DNA يکسان بود را برطرف کرد و امروزه تقريباً در تمامی آزمايشگاههای زيست مولکولی جزوکارهای متداول بوده و به صورت اتوماتيک بوسيله ی کامپيوتر انجام می شود. در سلول زنده فرایند همانندسازی پیچیده است و آنزیم ها و پروتئین های بسیاری در کپی برداری از ژنوم دخیل می باشند اما PCR تنها اجزا اصلی این ماشین همانندسازی پیچیده را برای تکثیر قطعات کوتاه DNA در لوله آزمایش مورد استفاده قرار می دهد. در یک سیستم بافری ساده، ناحیه ای از مولکول DNA به عنوان الگو توسط یک آنزیم DNA  پلیمراز که dNTPs را به عنوان بلوک های سازنده رشته جدید مورد استفاده قرار می دهد، کپی برداری می شود. آغازگرهای الیگونوکلئوتیدی با توالی خاص، بر اساس قوانین جفت شوندگی طبیعی بازها به رشته الگو متصل می شوند و ناحیه ای از مولکول الگو را که بایستی کپی برداری شود، تعیین می کنند.فرآیند PCR سه مرحله مشخص دارد که هر مرحله بوسیله تغییر در درجه حرارت تعیین می شود. در مرحله اول  DNA دو رشته ای واسرشت شده و دو رشته از هم جدا می شوند. در مرحله دوم درجه حرارت پایین می آید تا حدی که اتصال آغازگر به رشته الگو را امکان پذیر می سازد. در حین اتصال آغازگر به الگو، DNA پلیمراز مقاوم به حرارت فعال می شود و شروع به بسط آغازگرها می کند. بین هر مرحله تغییرات حرارتی، زمان پرش حرارتی وجود دارد و شامل مدت زمانی می باشد که درجه حرارت یک مرحله تغییر کرده تا به مرحله بعدی برسد و این مدت بستگی به نوع دستگاه به کار برده شده دارد. در مرحله سوم درجه حرارت دوباره افزایش می یابد تا اینکه به حد مناسب جهت فعالیت پلیمرازی آنزیم  DNA پلیمراز برسد.در اولین چرخه هر آغازگر، یک رشته جدید به وجود می آورد و این باعث دو برابر شدن کپی های ناحیه مورد نظر می شود. در این چرخه مضاعف شدن ادامه می یابد. اگر  PCR با 100% کارایی انجام گیرد، در طی 20 چرخه، بیش تر از یک میلیون نسخه از DNA هدف خواهیم داشت. البته در حالت عادی کارایی PCR 100% نمی باشد.

    

محصولات آزمایشگاه

کارگاه‌ها و بازدیدها

  • کارگاه آموزشی آشنایی با آزمون های میکروبیولوژی گوشت و فرآورده های گوشتی
    کارگاه آموزشی آشنایی با آزمون های میکروبیولوژی گوشت و فرآورد...
    کارگاه آموزشی آشنایی با آزمون های میکروبیولوژی گوشت و فرآورده های گوشتی
    مشاهده مطلب
  • کارگاه آموزشی آشنایی با آزمون های شیمیایی گوشت و فرآورده های گوشتی
    کارگاه آموزشی آشنایی با آزمون های شیمیایی گوشت و فرآورده های...
    کارگاه آموزشی آشنایی با آزمون های شیمیایی گوشت و فرآورده های گوشتی
    مشاهده مطلب
  • کارگاه طراحی پرایمر
    کارگاه طراحی پرایمر
    کارگاه طراحی پرایمر
    مشاهده مطلب
  • کارگاه طراحی
    کارگاه طراحی
    کارگاه طراحی
    مشاهده مطلب
  • کارگاه طراحی پرایمر
    کارگاه طراحی پرایمر
    کارگاه طراحی پرایمر
    مشاهده مطلب
  • کارگاه آموزش تئوری و عملی PCR و الکتروفورز (2)
    کارگاه آموزش تئوری و عملی PCR و الکتروفورز (2)
    کارگاه آموزش تئوری و عملی PCR و الکتروفورز (2)
    مشاهده مطلب
  • کارگاه آموزش تئوری و عملی PCR و الکتروفورز
    کارگاه آموزش تئوری و عملی PCR و الکتروفورز
    کارگاه آموزش تئوری و عملی PCR و الکتروفورز
    مشاهده مطلب
  • وبینار بین المللی Future Sources of Protein
    وبینار بین المللی Future Sources of Protein
    وبینار بین المللی Future Sources of Protein
    مشاهده مطلب
  •  تفاهم نامه همکاری آزمایشگاه میکروسکوپ الکترونی شرکت سماسازان و آزمایشگاه مرکزی پارک علم و فناوری مازندران
    تفاهم نامه همکاری آزمایشگاه میکروسکوپ الکترونی شرکت سماسازا...
    انعقاد تفاهم نامه همکاری فی مابین آزمایشگاه میکروسکوپ الکترونی شرکت سماسازان شمس بابل و آزمایشگاه مرکزی پارک علم و ...
    مشاهده مطلب
  • وبینار آموزشی آشنایی با کروماتوگرافی گازی GC
    وبینار آموزشی آشنایی با کروماتوگرافی گازی GC
    وبینار آموزشی آشنایی با کروماتوگرافی گازی GC
    مشاهده مطلب

دستگاه‌های آزمایشگاه

معرفی شبـکه آزمـایشگاهـی فنـاوری های راهبـردی